פּראָדוקטן
Lifecosm SARS-Cov-2-RT-PCR דיטעקשאַן קיט פֿאַר 2019-nCoV
דערוואַרט באַניץ
דער קיט איז געניצט פֿאַר די קוואַליטאַטיווע דיטעקשאַן פון נייַ קאָראָנאַווירוס (2019-nCoV) ניצן האַלדז סוואַבז, נאַסאָפאַרינגעאַל סוואַבז, בראָנטשאָאַלוועאָלאַר לאַוואַגע פליסיק, ספּוטום. זאָגן פֿאַר קליניש דיאַגנאָסיס און באַהאַנדלונג.א פולשטענדיק אַנאַליסיס פון די צושטאַנד איז רעקאַמענדיד אין קאָמבינאַציע מיט די פּאַציענט 'ס קליניש מאַנאַפעסטיישאַנז און אנדערע לאַבאָראַטאָריע טעסץ.
דורכקוק פּרינציפּ
די קיט איז באזירט אויף איין-שריט RT-PCR טעכנאָלאָגיע.אין פאַקט, די 2019 נייַ קאָראָנאַווירוס (2019-nCoV) ORF1ab און N גענעס זענען אויסגעקליבן ווי די אַמפּלאַפאַקיישאַן ציל מקומות.ספּעציפיש פּרימערז און פלורעסאַנט פּראָבעס (N דזשין פּראָבעס זענען לייבאַלד מיט FAM און ORF1ab פּראָבעס זענען לייבאַלד מיט העקס) זענען דיזיינד צו דעטעקט 2019 נייַ-טיפּ קאָראָנאַווירוס רנאַ אין סאַמפּאַלז.די קיט אויך כולל אַן ענדאָגענאָוס ינערלעך קאָנטראָל דיטעקשאַן סיסטעם (ינערלעך קאָנטראָל דזשין זאָנד מיט CY5) צו מאָניטאָר די פּראָצעס פון מוסטער זאַמלונג, רנאַ און פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן, און דערמיט רידוסינג פאַלש נעגאַטיוו רעזולטאַטן.
הויפּט קאַמפּאָונאַנץ
| קאַמפּאָונאַנץ | באַנד(48ט/קיט) |
| רט-פּקר אָפּרוף לייזונג | 96μל |
| nCOV אָנפאַנגער TaqMan פּראָבעמיקסטשער (ORF1ab, N Gene, RnaseP Gene) | 864μל |
| נעגאַטיוו קאָנטראָל | 1500μל |
| nCOV positive קאָנטראָל（ל ORF1ab N Gene) | 1500μל |
אייגענע רייידזשאַנץ: רנאַ יקסטראַקשאַן אָדער רייניקונג רייידזשאַנץ.נעגאַטיוו / positive קאָנטראָל: די positive קאָנטראָל איז רנאַ מיט די ציל פראַגמענט, בשעת די נעגאַטיוו קאָנטראָל איז נוקלעיק זויער-פֿרייַ וואַסער.בעשאַס נוצן, זיי זאָל אָנטייל נעמען אין די יקסטראַקשאַן און זאָל זיין געהאלטן ינפעקטיאָוס.זיי זאָל זיין כאַנדאַלד און דיספּאָוזד אין לויט מיט באַטייַטיק רעגיאַליישאַנז.
די ינערלעך רעפֿערענץ דזשין איז דער מענטש RnaseP דזשין.
סטאָרידזש טנאָים און עקספּעריישאַן טאָג
-20±5 ℃, ויסמיידן ריפּיטיד ייַז קאַלט און טאָינג מער ווי 5 מאל, גילטיק פֿאַר 6 חדשים.
אָנווענדלעך קיילע
מיט FAM / HEX / CY5 און אנדערע מולטי-קאַנאַל פלורעסאַנט פּקר קיילע.
ספּעסאַמאַנז באדערפענישן
1. אָנווענדלעך ספּעסאַמאַנז טייפּס: האַלדז סוואַבז, נאַסאָפאַרינגעאַל סוואַבז, בראָנטשאָאַלוועאָלאַר לאַוואַגע פליסיק, ספּוטום.
2. ספּעסימען זאַמלונג (אַסעפּטיק טעכניק)
פאַרינגעאַל ווישער: ווישן די טאָנסילס און די שפּעטערדיק פאַרינדזשאַל וואַנט מיט צוויי סוואַבז אין דער זעלביקער צייט, און ייַנטונקען די ווישער קאָפּ אין אַ פּראָבע רער מיט די מוסטערונג לייזונג
ספּוטום: נאָך דער פּאַציענט האט אַ טיף הוסט, זאַמלען די הוסט ספּוטום אין אַ שרויף היטל פּרובירן רער מיט די מוסטערונג לייזונג;בראָנטשאָאַלוועאָלאַר לאַוואַגע פליסיק: מוסטערונג דורך מעדיציניש פּראָפעססיאָנאַלס.3.סטאָרידזש און טראַנספּערטיישאַן פון סאַמפּאַלז
ספּעסאַמאַנז פֿאַר ווירוס אפגעזונדערטקייט און רנאַ טעסטינג זאָל זיין טעסטעד ווי באַלד ווי מעגלעך.ספּעסאַמאַנז וואָס קענען זיין דיטעקטאַד ין 24 שעה קענען זיין סטאָרד בייַ 4 ℃;די וואָס קענען ניט זיין דיטעקטאַד ין 24
שעה זאָל זיין סטאָרד בייַ -70 ℃ אָדער אונטן (אויב עס איז קיין סטאָרידזש צושטאַנד פון -70 ℃, זיי זאָל זיין
טעמפּערעראַלי סטאָרד אין -20 ℃ פרידזשידער).ספּעסאַמאַנז זאָל ויסמיידן ריפּיטיד ייַז קאַלט און טאָינג בעשאַס טראַנספּערטיישאַן.ספּעסאַמאַנז זאָל זיין געשיקט צו דער לאַבאָראַטאָריע ווי באַלד ווי מעגלעך נאָך זאַמלונג.אויב סאַמפּאַלז דאַרפֿן צו זיין טראַנספּאָרטאַד איבער לאַנג דיסטאַנסאַז, טרוקן אייז סטאָרידזש איז רעקאַמענדיד.
טעסט מעטהאָדס
1 מוסטער פּראַסעסינג און רנאַ יקסטראַקשאַן (מוסטער פּראַסעסינג געגנט)
עס איז רעקאַמענדיד צו נעמען 200μל פליסיק מוסטער פֿאַר רנאַ יקסטראַקשאַן.פֿאַר פֿאַרבונדענע יקסטראַקשאַן סטעפּס, אָפּשיקן צו די ינסטראַקשאַנז פון געשעפט רנאַ יקסטראַקשאַן קיץ.ביידע נעגאַטיוו און נעגאַטיוו
קאָנטראָלס אין דעם קיט זענען ינוואַלווד אין די יקסטראַקשאַן.
2 פּקר רעאַגענט צוגרייטונג (רעאַגענט צוגרייטונג געגנט)
2.1 אַראָפּנעמען אַלע קאַמפּאָונאַנץ פון די קיט און טאָ און מישן אין צימער טעמפּעראַטור.סענטריפיודזש ביי 8,000 רפּם פֿאַר אַ ביסל סעקונדעס איידער נוצן;רעכענען די פארלאנגט סומע פון ריידזשאַנץ, און דער אָפּרוף סיסטעם איז צוגעגרייט ווי געוויזן אין די פאלגענדע טיש:
| קאַמפּאָונאַנץ | N סערווינג (25 μל סיסטעם) |
| nCOV אָנפאַנגער TaqMan פּראָבעמיקסטשער | 18 μl × N |
| רט-פּקר אָפּרוף לייזונג | 2 μl × N |
| * N = נומער פון סאַמפּאַלז טעסטעד + קסנומקס (נעגאַטיוו קאָנטראָל) + קסנומקס (נקאָווpositive קאָנטראָל) | |
2.2 נאָך ונ דורך מיקסינג די קאַמפּאָונאַנץ, סענטריפודזש פֿאַר אַ קורץ צייט צו לאָזן אַלע די פליסיק אויף די רער וואַנט פאַלן צו די דנאָ פון די רער, און דעמאָלט אַליקוואָט די 20 μל אַמפּלאַפאַקיישאַן סיסטעם אין די פּקר רער.
3 מוסטערונג (פּרעמיע צוגרייטונג געגנט)
לייג 5μל פון די נעגאַטיוו און positive קאָנטראָלס נאָך יקסטראַקשאַן.די רנאַ פון די מוסטער צו זיין טעסטעד איז מוסיף צו די פּקר אָפּרוף רער.
קאַפּ די רער טייטלי און סענטריפודזש ביי 8,000 רפּם פֿאַר אַ ביסל סעקונדעס איידער טראַנספערינג עס צו די אַמפּלאַפאַקיישאַן דיטעקשאַן געגנט.
4 פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן (אַמפּלאַפייד דיטעקשאַן געגנט)
4.1 שטעלן די אָפּרוף רער אין די מוסטער צעל פון די קיילע, און שטעלן די פּאַראַמעטערס ווי גייט:
| בינע | ציקל נומער | טעמפּעראַטור(°C) | צייַט | זאַמלונגפּלאַץ |
| פאַרקערטטראַנסקריפּציע | 1 | 42 | 10מין | - |
| פאַר-דענאַטוראַטיאָןn | 1 | 95 | 1מין | - |
| ציקל | 45 | 95 | 15 ס | - |
| 60 | 30 ס | דאַטן זאַמלונג |
סעלעקציע פון ינסטרומענט דיטעקשאַן קאַנאַל: אויסקלייַבן די FAM、HEX、CY5 קאַנאַל פֿאַר די פלורעסאַנס סיגנאַל.פֿאַר רעפֿערענץ פלורעסאַנט NONE, ביטע טאָן ניט קלייַבן ROX.
5 רעזולטאַט אַנאַליסיס (ביטע אָפּשיקן צו די יקספּערמענאַל ינסטראַקשאַנז פון יעדער קיילע פֿאַר באַשטעטיקן)
נאָך דער אָפּרוף, ראַטעווען די רעזולטאַטן.נאָך אַנאַליסיס, סטרויערן די סטאַרטינג ווערט, סאָף ווערט, און שוועל ווערט פון די באַסעלינע לויט די בילד (דער באַניצער קענען סטרויערן לויט די פאַקטיש סיטואַציע, די סטאַרטינג ווערט קענען זיין שטעלן צו 3 ~ 15, די סוף ווערט קענען זיין שטעלן צו 5 ~ 20, אַדזשאַסטמאַנט) אין די לאָגאַריטהמיק גראַפיק אין די שוועל פון די פֿענצטער, די שוועל שורה איז אין די לאָגאַריטהמיק פאַסע, און די אַמפּלאַפאַקיישאַן ויסבייג פון די נעגאַטיוו קאָנטראָל איז אַ גלייַך שורה אָדער אונטער די שוועל שורה).
6 קוואַטי קאָנטראָל (אַ פּראַסידזשעראַל קאָנטראָל איז אַרייַנגערעכנט אין די פּראָבע) נעגאַטיוו קאָנטראָל: קיין קלאָר ווי דער טאָג אַמפּלאַפאַקיישאַן ויסבייג פֿאַר FAM, HEX, CY5 דיטעקשאַן טשאַנאַלז.
COV positive קאָנטראָל: קלאָר ווי דער טאָג אַמפּלאַפאַקיישאַן ויסבייג פון FAM און העקס דיטעקשאַן טשאַנאַלז, Ct ווערט ≤32, אָבער קיין אַמפּלאַפאַקיישאַן ויסבייג פון CY5 קאַנאַל;
די אויבן באדערפענישן מוזן זיין באגעגנט סיימאַלטייניאַסלי אין דער זעלביקער עקספּערימענט;אַנדערש, דער עקספּערימענט איז פאַרקריפּלט און דאַרף זיין ריפּיטיד.
7 באַשטימונג פון רעזולטאַטן.
7.1 אויב עס איז קיין אַמפּלאַפאַקיישאַן ויסבייג אָדער Ct ווערט> 40 אין די FAM און HEX טשאַנאַלז פון די פּראָבע מוסטער, און עס איז אַ אַמפּלאַפאַקיישאַן ויסבייג אין די CY5 קאַנאַל, עס קענען זיין געמשפט אַז עס איז קיין 2019 נייַ קאָראָנאַווירוס (2019-nCoV) רנאַ אין דער מוסטער;
.2 אויב די פּראָבע מוסטער האט קלאָר ווי דער טאָג אַמפּלאַפאַקיישאַן קורוועס אין די FAM און HEX טשאַנאַלז, און די Ct ווערט איז ≤40, עס קענען זיין געמשפט אַז דער מוסטער איז positive פֿאַר די 2019 נייַ קאָראָנאַווירוס (2019-nCoV).
7.3 אויב די פּראָבע מוסטער האט אַ קלאָר אַמפּלאַפאַקיישאַן ויסבייג בלויז אין איין קאַנאַל פון FAM אָדער העקס, און די Ct ווערט איז ≤40, און עס איז קיין אַמפּלאַפאַקיישאַן ויסבייג אין די אנדערע קאַנאַל, די רעזולטאַטן דאַרפֿן צו זיין ריטעסטעד.אויב די רעטעסט רעזולטאטן זענען קאָנסיסטענט, די מוסטער קענען זיין געמשפט צו זיין positive פֿאַר די נייַע
קאָראָנאַווירוס 2019 (2019-nCoV).אויב די רעטעסט רעזולטאַט איז נעגאַטיוו, עס קען זיין געמשפט אַז דער מוסטער איז נעגאַטיוו פֿאַר 2019 נייַ קאָראָנאַווירוס (2019-nCoV).
Positive משפט ווערט
די ROC ויסבייג אופֿן איז געניצט צו באַשטימען די רעפֿערענץ קאָרט ווערט פון די קיט און די ינערלעך קאָנטראָל רעפֿערענץ ווערט איז 40.
ינטערפּריטיישאַן פון פּרובירן רעזולטאַטן
1. יעדער עקספּערימענט זאָל זיין טעסטעד פֿאַר נעגאַטיוו און positive קאָנטראָלס.טעסט רעזולטאַטן קענען זיין באשלאסן בלויז ווען קאָנטראָלס טרעפן קוואַליטעט קאָנטראָל רעקווירעמענץ
2. ווען די FAM און העקס דיטעקשאַן טשאַנאַלז זענען positive, דער רעזולטאַט פון די CY5 קאַנאַל (ינערלעך קאָנטראָל קאַנאַל) קען זיין נעגאַטיוו רעכט צו סיסטעם פאַרמעסט.
3. ווען די ינערלעך קאָנטראָל רעזולטאַט איז נעגאַטיוו, אויב די FAM און העקס דיטעקשאַן טשאַנאַלז פון די פּראָבע רער זענען אויך נעגאַטיוו, דאָס מיטל אַז די סיסטעם איז פאַרקריפּלט אָדער די אָפּעראַציע איז פאַלש, די פּראָבע איז פאַרקריפּלט.דעריבער, די סאַמפּאַלז דאַרפֿן צו זיין ריטעסטעד.
